描述：ATP含量檢測試劑盒。它普遍存在于細菌等微生物細胞內，ATP是微生物新陳代謝的能量物質(zhì)。ATP生物發(fā)光法是利用ATP試劑中若干組分如熒光素-熒光素酶等與被測樣本反應產(chǎn)生光子，再利用專(zhuān)門(mén)研制的熒光檢測儀來(lái)捕捉和檢測發(fā)光值，由于被測樣本所含細菌等微生物的數量與所含的ATP值、以及ATP值與發(fā)光值之間存在一定的函數關(guān)系，因此通過(guò)檢測發(fā)光值即能得到被測標本所含細菌等微生物含量。

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ATP含量檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱(chēng)：ATP含量檢測試劑盒

貨號：YX09117

規格：50T/48S

儲存條件：具體以標簽為準

有效期：6個(gè)月

檢測意義：

三磷酸腺苷(adenosine 5-triphosphate,ATP)是生物體內能量轉換最基本的載

體,其含量的變化直接關(guān)系到各器官的能量代謝。ATP 作為最重要的能量分子在細胞的各種生理、病理過(guò)程中起著(zhù)重要作用。ATP 水平的改變,會(huì )影響許多細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下,ATP 水平會(huì )下降,而高葡萄糖刺激等對于一些細胞可以上調細胞內 ATP 水平。通常 ATP 水平的下降表明線(xiàn)粒體的功能受損或下降,在細胞凋亡時(shí) ATP 水平的下降通常和線(xiàn)粒體的膜電位下降同時(shí)發(fā)生狀態(tài)。 ATP 含量測定試劑盒可以用于檢測紅細胞或組織內的 ATP 水平。

測定原理: 肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸,生成磷酸肌酸,用磷鉬酸比色法進(jìn)

行檢測

樣本前處理:

1、紅細胞:抗凝全血取下層壓積紅細胞,一般按 1:4 的體積比加雙蒸水進(jìn)行稀釋,再 混勻使溶血,制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮 10 分 鐘,取出混勻抽提 1 分鐘,4000 轉/分鐘離心 10 分鐘,取上清液待測。

2、組織樣本:準確稱(chēng)取組織稱(chēng)重,按重量(g):體積(mL)=1：9 的比例,加入 9 倍體積的沸雙蒸水,制成 10%的勻漿液,再置于沸水浴中煮 10 分鐘,取出混勻抽提 1 分鐘,3500 轉/分離心 10 分鐘,取上清液待測。

3、培養細胞:先離心處理將細胞與培養上清分離,除去培養上清,得到下層沉淀細胞 (一般細胞數量達到 106),將收集好的細胞加入 300～500uL 熱雙蒸水,置于熱水浴 (90-100℃)中勻漿破碎,后將細胞懸液于沸水浴中加熱 10 分鐘,取出混勻抽提 1 分鐘,即可用于測定(如果存在大塊細胞碎片,需離心后取上清測定)。

注:混勻抽提 1 分鐘即為漩渦混勻 1 分鐘。

注意事項:

1、此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。對測定所用試管要求嚴格,要求不能有任何磷污染,建議使用全新一次性塑料試管,避免磷污染是檢測成敗的關(guān)鍵;

2、顯色應用液配好后,不可放置太久,一般可保存五天,最好現用現配。隨時(shí)放冰箱 。

3、組織勻漿宜用 2%~5%濃度的勻漿上清,若樣本濃度過(guò)高,則底色過(guò)深(對照管 OD 過(guò) 高)需稀釋后再進(jìn)行測定;一般通過(guò)做預試驗將對照 OD 值控制在 1.0 以下

4、為了您的安全與健康，實(shí)驗時(shí)請佩戴一次性手套。

5、本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗用，不做其他用途。